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Microfluidic magnetic cell sorting system for cancer diagnosis / Laure Saias in La Houille blanche, N° 5 (2009) 

Public ISBD [article]  in La Houille blanche > N° 5 (2009) . - p. 105-111 Titre : Microfluidic magnetic cell sorting system for cancer diagnosis Titre original : Système microfluidique pour le tri et l'analyse de cellules dans le diagnostic du cancer Type de document : texte imprimé Auteurs : Laure Saias, Auteur ; Saliba, Antoine-Emmanuel, Auteur ; Viovy, Jean-Louis, Auteur Article en page(s) : p. 105-111 Note générale : Hydraulique 1er congrès européen de microfluidique Résumés en Français et Anglais Langues : Anglais (eng) Mots-clés : Microfluidique  Cellules  --  Analyse  Cancer Index. décimale : 551.4 Résumé : This project is aimed at developing a new integrated microfluidic system for high throughput cell sorting and analysis. This micro-device will be able to sort rare population of cells, like circulating tumor cells (CTC) in whole blood, and analyze them by bright field and fluorescence microscopy at high magnification. Evaluating the concentration of CTC in blood will have a strong diagnosis and prognosis value, for evaluating risks of metastases and tumor cells dissemination. Cell sample flows through an array of magnetic columns that are coated with antibodies. These antibodies are specific of membrane protein that are expressed by the target cells and allow their capture in chip. Once they are trapped on columns, their shape and the expression of other proteins are observed by microscopy. As a proof of concept, Raji cells (B lymphocytes, CD19+) mixed with Jurkat cells (T lymphocytes, CD19-) with an initial concentration of 1/1000 are sorted in an array of magnetic beads functionalized with anti-CD19 antibodies. 500μL of sample are analyzed within 1 hour with a global capture yield of 55 +/- 10 %. The captured cells are then stained with immunofluorescent probes which provide membrane (anti- CD19-AlexaFluor 488) and nucleus (Hoechst) imaging. Imagining can be performed at high resolution microscopy, including 100X oil immersion objectives. Ce projet a pour objectif de développer un nouveau système microfluidique pour le tri et l'analyse de cellules à haut débit. Ce système pourra collecter des populations de cellules rares, comme des cellules tumorales circulantes (CTC) dans le sang, et les analyser en champ clair ainsi qu'en microscopie de fluorescence à haute résolution. L'évaluation de la concentration des CTC dans le sang, lié au risque de développement de métastases et de dissémination de cellules tumorales, aura un impact diagnostic et pronostic élevé. L'échantillon cellulaire s'écoule à travers un réseau de colonnes magnétiques couvertes d'anticorps. Ces anticorps sont spécifiques d'une protéine membranaire exprimée par les cellules cibles et permettent la capture de ces cellules dans la puce. Une fois les cellules immobilisées sur les colonnes, leur morphologie et l'expression d'autres protéines sont observées par microscopie. En temps que preuve de concept, des Raji ( lymphocytes B, CD19+) sont mélangées à des Jurkat( lymphocytes T, CD19-) à une concentration de 1/1000 et sont capturées dans le réseau de colonnes de billes magnétiques fonctionnalisées avec des anticorps anti-CD19. Un échantillon de 500μL est analysé en 1 heure avec un rendement global de 55 +/- 10 %. Les cellules capturées sont ensuite colorées avec des sondes immunofluorescentes afin d'imager leur membrane (anti-CD19-AlexaFluor 488) et leur noyau (Hoechst). Ces images peuvent être réalisées à haute résolution avec un grossissement de 100X. DEWEY : 553.7 ISSN : 0018-6368 RAMEAU : Microfluidique En ligne : http://www.shf-lhb.org/index.php?option=article&access=standard&Itemid=129&url=/ [...] [article] Microfluidic magnetic cell sorting system for cancer diagnosis = Système microfluidique pour le tri et l'analyse de cellules dans le diagnostic du cancer [texte imprimé] / Laure Saias, Auteur ; Saliba, Antoine-Emmanuel, Auteur ; Viovy, Jean-Louis, Auteur . - p. 105-111. Hydraulique 1er congrès européen de microfluidique Résumés en Français et Anglais Langues : Anglais (eng) in La Houille blanche > N° 5 (2009) . - p. 105-111 Mots-clés : Microfluidique  Cellules  --  Analyse  Cancer Index. décimale : 551.4 Résumé : This project is aimed at developing a new integrated microfluidic system for high throughput cell sorting and analysis. This micro-device will be able to sort rare population of cells, like circulating tumor cells (CTC) in whole blood, and analyze them by bright field and fluorescence microscopy at high magnification. Evaluating the concentration of CTC in blood will have a strong diagnosis and prognosis value, for evaluating risks of metastases and tumor cells dissemination. Cell sample flows through an array of magnetic columns that are coated with antibodies. These antibodies are specific of membrane protein that are expressed by the target cells and allow their capture in chip. Once they are trapped on columns, their shape and the expression of other proteins are observed by microscopy. As a proof of concept, Raji cells (B lymphocytes, CD19+) mixed with Jurkat cells (T lymphocytes, CD19-) with an initial concentration of 1/1000 are sorted in an array of magnetic beads functionalized with anti-CD19 antibodies. 500μL of sample are analyzed within 1 hour with a global capture yield of 55 +/- 10 %. The captured cells are then stained with immunofluorescent probes which provide membrane (anti- CD19-AlexaFluor 488) and nucleus (Hoechst) imaging. Imagining can be performed at high resolution microscopy, including 100X oil immersion objectives. Ce projet a pour objectif de développer un nouveau système microfluidique pour le tri et l'analyse de cellules à haut débit. Ce système pourra collecter des populations de cellules rares, comme des cellules tumorales circulantes (CTC) dans le sang, et les analyser en champ clair ainsi qu'en microscopie de fluorescence à haute résolution. L'évaluation de la concentration des CTC dans le sang, lié au risque de développement de métastases et de dissémination de cellules tumorales, aura un impact diagnostic et pronostic élevé. L'échantillon cellulaire s'écoule à travers un réseau de colonnes magnétiques couvertes d'anticorps. Ces anticorps sont spécifiques d'une protéine membranaire exprimée par les cellules cibles et permettent la capture de ces cellules dans la puce. Une fois les cellules immobilisées sur les colonnes, leur morphologie et l'expression d'autres protéines sont observées par microscopie. En temps que preuve de concept, des Raji ( lymphocytes B, CD19+) sont mélangées à des Jurkat( lymphocytes T, CD19-) à une concentration de 1/1000 et sont capturées dans le réseau de colonnes de billes magnétiques fonctionnalisées avec des anticorps anti-CD19. Un échantillon de 500μL est analysé en 1 heure avec un rendement global de 55 +/- 10 %. Les cellules capturées sont ensuite colorées avec des sondes immunofluorescentes afin d'imager leur membrane (anti-CD19-AlexaFluor 488) et leur noyau (Hoechst). Ces images peuvent être réalisées à haute résolution avec un grossissement de 100X. DEWEY : 553.7 ISSN : 0018-6368 RAMEAU : Microfluidique En ligne : http://www.shf-lhb.org/index.php?option=article&access=standard&Itemid=129&url=/ [...]